酶標(biāo)儀濾光片的應(yīng)用與介紹

   酶標(biāo)儀（MicroplateReader）是對酶聯(lián)免疫檢測（EIA）實驗結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)免疫反應(yīng)通過偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進(jìn)行的，反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示，通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測抗體或抗原的濃度。   隨著檢測方式的發(fā)展，擁有多種檢測模式的單體臺式酶標(biāo)儀叫做多功能酶標(biāo)儀，可檢測吸光度（Abs)、熒光強度(FI)、時間分辨熒光（TRF)、熒光偏振（FP)、和化學(xué)發(fā)光（Lum)。  

 酶標(biāo)儀從原理上可以分為光柵型酶標(biāo)儀和濾光片型酶標(biāo)儀。光柵型酶標(biāo)儀可以截取光源波長范圍內(nèi)的任意波長，而濾光片型酶標(biāo)儀則根據(jù)選配的生化儀干涉濾光片，只能截取特定波長進(jìn)行檢測。   酶標(biāo)儀工作原理：   酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下，檢測被測物的吸光值。光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片之后變成一束單色光，進(jìn)入塑料微孔極中的待測標(biāo)本.該單色光一部分被標(biāo)本吸收，另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上，光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號.電信號經(jīng)前置放大，對數(shù)放大，模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計算，最后由顯示器和打印機顯示結(jié)果。 

   酶標(biāo)儀濾光片的放置：   在使用濾光片作濾波裝置時與普通比色計一樣，酶標(biāo)儀濾光片即可放在微孔板的前面，也可放在微孔板的后面，聚光鏡，光欄后到達(dá)反射鏡，經(jīng)反射鏡作90°反射后垂直通過比色溶液,然后再經(jīng)濾光片送到光電管. 

   酶標(biāo)儀檢測什么？   光通過被檢測物，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。檢測單位用OD值表示， OD是optical density（光密度）的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度   檢測結(jié)果的影響因素：   由于有相當(dāng)多的因素會影響檢測的結(jié)果，如不同的酶標(biāo)板，檢測試劑的體積，都會造成OD值的不同，因此，只有使用同一酶標(biāo)板反應(yīng)的試劑檢測結(jié)果才能比較和分析。  

 酶標(biāo)儀的用途：   可廣泛應(yīng)用于低紫外區(qū)的DNA、RNA定量及純度分析（A260/A280）和蛋白定量（A280/BCA/Braford/Lowry），酶活、酶動力學(xué)檢測，酶聯(lián)免疫測定（ELISAs），細(xì)胞增殖與毒性分析，細(xì)胞凋亡檢測（MTT），報告基因檢測及G蛋白偶聯(lián)受體分析（GPCR）等